Материалы:

a. Подготовьте 20 прядей волос

b. Приготовьте буфер для лизиса волосяных фолликулов с 1 × буфером ПЦР (50 ммоль · L ^-1 KCl, 10 ммоль · L ^-1 Tris · Cl, 0,01% желатина) Добавьте MgCl2 до 2 ммоль · L ^-1 , Протеиназа K 20 мг · L ^-1

Методы экстракции ДНК из волос

1. Тщательно промойте волосы 70% этанолом. Затем дважды промойте волосы дистиллированной водой.

2. Поместите от 1 до 4 прядей волос в каждую из 5 пробирок ПЦР объемом 200 мкл. Поместите волосяные фолликулы на дно пробирок ПЦР и используйте чистые ножницы, чтобы отрезать часть волоса, выступающую над уровнем пробирки. Подготовьте контрольную пробирку без образца.

3. Добавьте 15 мкл приготовленного буфера для лизиса волосяных фолликулов в каждую пробирку.

4. Задайте одноцикловую программу на приборе ПЦР: 65 ℃ 30 мин, 95 ℃ 15 мин, 4 ℃ 10 мин. Поместите пробирку ПЦР из предыдущего шага в предварительно нагретый прибор ПЦР и запустите программу.

5. После завершения программы немедленно центрифугируйте пробирку ПЦР, возьмите 2 мкл в качестве шаблона ПЦР, а оставшуюся часть поместите при -20 ℃